1、無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30min以上，或在使用前30min，對內外室用5%石炭酸噴霧。
2、用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
3、將各種需用物品搬進(jìn)內室清點(diǎn)、就位，用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進(jìn)內室工作。
4、接種操作前，用70%酒精棉球擦手；進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，動(dòng)作要輕緩，盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚塵。
5、工作中應注意安全。如遇棉塞著(zhù)火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴大燃燒；如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時(shí)，應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續操作。
6、工作結束，立即將臺面收拾干凈，將不應在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后，對無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧，或開(kāi)紫外線(xiàn)燈照射30min。
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